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    上海仁捷生物教你ELISA檢測試劑盒常見問題處理

    更新時間:2017-08-03      瀏覽次數(shù):1689

    ELISA檢測試劑盒常見問題處理
     
    出現(xiàn)問題出現(xiàn)問題的原因解決辦法
    曲線
     
     
     
     
     
     
     
     
     
     
     
     
     
     
     
     
     
     
     
     
     
    OD值不正常
     
     
     
     
     
     
     
    試劑盒未回溫試劑盒回溫到25℃
    溫度控制不好控制正確溫度
    孵育時間不準確控制孵育時間
    洗滌時沖擊力太大、浸泡時間過長、洗滌次數(shù)增加洗滌4-5次,每孔250ul,然后拍干
    陽光直射,對著風直接吹避風避光
    酶標儀的波長錯誤酶標儀的波長450nm
    抗體的稀釋錯誤正確的稀釋抗體
    水質問題用娃哈哈礦泉水代替
     
    白   板
     
     
    洗滌液配制錯誤正確的配制洗滌液
    少加液體(抗體、酶標記物、A液、B液)正確的步驟加液體
    錯加液體 
     
    無 梯 度
     
     
    標準品也污染換標準品點板
    OD值不正常控制溫度時間在做一次
    人為點板/
    線 性 不 好
     
    OD值不正常控制溫度時間在做一次
    人為點板/
    回  收  率
     
     
     
     
     
     
     
    空白管陽性高
     
     
    樣本本身就是陽性樣本換陰性樣本做回收率
    空白管在實驗中被污染實驗中防止交叉污染
    水質原因用娃哈哈礦泉水代替
     
     
    偏  高
     
     
     
     
    添加量不準確的添加量
    添加濃度不適合添加合適的濃度
    取液吹干量多準確的取液吹干
    取到其它相層液體取需用相吹干
    復溶液未稀釋或加入量少正確的稀釋復溶液
     
    偏  低
     
     
     
    添加量不準確的添加量
    添加濃度不適合添加合適的濃度
    取液吹干量少準確的取液吹干
    復溶液稀釋錯誤或加入量多正確的稀釋復溶液
     
     
    假陰、陽性
     
     
     
     
     
    水質原因點復溶液驗證用娃哈哈礦泉水代替
    實驗操作原因
     
     
     
    吸取到其它相吹干準確的取液吹干
    離心不*延長離心時間
    樣本的污染更換樣本
    乳化未處理*溫?。?0℃)處理乳化現(xiàn)象
    儀器試劑原因
     
    離心管未清洗干凈正確的洗滌器具
    有機溶劑的影響做試劑空白看影響結果
    衍生化試劑原因(長時間衍生化試劑變質)更換衍生化試劑
    與曲線好壞相關保證曲線的正常
     
     
    金標檢測(T)線顏色較淺
     
     
    尿液pH偏堿性用0.01M HCl調節(jié)尿液pH值到7.0左右。
    尿樣滴加過多重新測定,尿樣按照說明書,控制在2滴
    尿液過于混濁將尿液離心后,取上清液重新測定
     
     
    金標質控(C)線不出現(xiàn)
     
     
     
     
     
     
    檢測卡由于高溫、受潮等原因失效尿樣需要重新檢測。
    過了有效期失效。該批號的金標應丟棄處理,尿液需要重新檢測
     
    操作過程中檢測卡沒有平放,導致液體樣品直接沖過檢測區(qū)尿樣需要重新檢測,且檢測卡平放于桌面上再加樣。
    尿液樣品中含有較高的抑制或者干擾抗原抗體反應的物質(比如明礬、小蘇打、氧化劑、肌酐等)該尿液的檢測結果無效
    金標卡上在除了T和C線之外的其他地方出線金標卡上的劃痕;膠體金在跑板過程中沒有*跑干凈而在卡上的痕跡;該檢測卡結果不可信,尿液需要重新檢測。
    實驗重復性不好操作人員的不一致,取樣的不一致,樣本數(shù)量的多少,加樣時間的長短,洗滌條件不一致,加樣量不一致盡量保持的實驗一致性
     
    分析軟件的使用
     
    不能設置和保存正確的設置和保存
    如何判斷曲線的好壞和分析結果正確的判斷曲線的好壞和分析結果
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